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Konzentrationen umrechnen
Sie wollen in einem Experiment den geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Glykolyse untersuchen, die Umwandlung von Fructose-6-Phosphat in Fructose-1-6-Biphosphat. Diese Reaktion wird katalysiert durch das Enzym Phosphofruktokinase (PFK). Bei der Umwandlung wird ATP verbraucht.
Sie wollen einen Ansatz von 0,2 ml (= 200 µl) pipettieren, in dem folgende Komponenten in der jeweils hinter dem Doppelpunkt stehenden Konzentration vorkommen sollen:
- Phosphofruktokinase: 50 µg/ml
- Fructose-6-Phosphat: 10 mM (milli Molar)
- ATP: 1,5 mM
- Probenpuffer: 1-fach
Sie haben die vier Komponenten in den folgenden Konzentrationen im Labor:
- Phosphofruktokinase: 500 µg/ml
- Fructose-6-Phosphat: 50 mM
- ATP: 10 mM
- Probenpuffer: 5-fach konzentriert
Wie viel müssen Sie von jeder Komponente nehmen, um den gewünschten Ansatz zu erhalten? Nach dem Pipettieren füllen Sie das Reaktionsgemisch mit Wasser auf 200 µl auf.
Akkordeonelement: Formel zur Lösung
c1∙V1 = c2∙V2
c = Konzentration; V = Volumen
Phosphofructokinase 500 µg/ml
Fructose-6-Phosphat 50 mM
ATP 10 mM
Probenpuffer 5fach konzentriert
Wasser
Konzentrationen umzurechnen gehört zum täglichen Laborleben wie die Benutzung der Pipette. Im Laufe Ihres Studiums werden Sie darin so geübt, dass das Ansetzen von Reaktionsgemischen mit der Zeit kein Problem mehr darstellen sollte.